對(duì)豬群用唾液檢測(cè)法來(lái)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，這在國(guó)內(nèi)正式報(bào)告尚屬首次，但在美國(guó)已經(jīng)在2年前用于檢測(cè)PRRS病毒，而在人醫(yī)上，唾液已經(jīng)應(yīng)用到檢測(cè)艾滋病。人們習(xí)慣的血清學(xué)檢測(cè)由于對(duì)血液采集技術(shù)要求高，對(duì)豬應(yīng)激大，一些豬場(chǎng)往往只在發(fā)病時(shí)才對(duì)豬群進(jìn)行檢測(cè)，但如果唾液檢測(cè)法能適用，十分值得推廣。本文簡(jiǎn)單介紹唾液檢測(cè)法的使用方法，供參考。
血清學(xué)檢測(cè)在豬群免疫監(jiān)測(cè)和疾病診斷中發(fā)揮著重大作用，但由于血液采集對(duì)技術(shù)要求較高，必須具備專(zhuān)用的血清分離設(shè)備(如離心機(jī)等)，且操作程序復(fù)雜，況且一旦發(fā)生溶血或污染，對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響較大。人們一直期望有新的檢測(cè)方法，唾液學(xué)方法是其中較有發(fā)展前景的方法之一。
唾液學(xué)方法有很多優(yōu)點(diǎn)：采集的唾液可以直接冷凍，唾液中的各種酶類(lèi)(如唾液淀粉酶、堿性蛋白酶)和抗菌物質(zhì)可以使樣品保存更長(zhǎng)時(shí)間；采集唾液的方法簡(jiǎn)單，所以唾液學(xué)方法對(duì)機(jī)體無(wú)任何損傷，不會(huì)造成豬只應(yīng)激。另外，唾液中的抗體以分泌型抗體為主，對(duì)于免疫功能的解釋具有特殊的意義。
唾液采集方法:
唾液采集的方法非常簡(jiǎn)單，利用豬只的好奇心理以及嗜好咀嚼的特性，采用紗布球采集唾液。將紗布制作成紗布球固定于金屬線(xiàn)前端，豬只會(huì)主動(dòng)咀嚼紗布球，唾液將通過(guò)虹吸現(xiàn)象進(jìn)入紗布球內(nèi)。將紗布球內(nèi)的唾液擠壓出，釋放至樣品袋袋內(nèi)。將樣品袋內(nèi)的唾液轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
檢測(cè)方法:
采集的血液必須進(jìn)行預(yù)處理，方可進(jìn)行抗體或病原等項(xiàng)目的檢測(cè)。10x104轉(zhuǎn)/分鐘，離心1分鐘，去除雜質(zhì)，留取上清。按照常規(guī)程序進(jìn)行ELISA或PCR檢測(cè)。
結(jié)果判定:
1、唾液中的病原檢測(cè)若呈陽(yáng)性，說(shuō)明機(jī)體正在排毒。
2、由于唾液中的抗體和血液中的抗體不是同一個(gè)概念，必須避免使用對(duì)血清抗體的理解來(lái)解釋唾液中抗體的作用。血清中的抗體大部分為循環(huán)抗體，某些循環(huán)抗體的抗病活性較低，只能與抗原起機(jī)械結(jié)合作用。而分泌型抗體的產(chǎn)生速度是血清循環(huán)抗體產(chǎn)生速度的兩倍，分泌型抗體除具有機(jī)械結(jié)合作用外，尚具有對(duì)抗原的主動(dòng)捕捉作用，補(bǔ)體的經(jīng)典和補(bǔ)充途徑激活作用，ADCC作用以及凝集作用。
為了便于理解唾液中的抗體作用，可以采用相對(duì)抗體(相對(duì)量抗體)的概念。
相對(duì)抗體:
指按照同一方法檢測(cè)出抗體量的相對(duì)大小，往往指同一實(shí)驗(yàn)室，同一類(lèi)試劑盒，同一類(lèi)樣品所得出結(jié)果的相對(duì)大小(百分比表示)。相對(duì)抗體的修正參數(shù)必須建立在大量檢測(cè)數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)之上，這些數(shù)據(jù)必須包括完全陰性值，低抗體滴度值，中抗體滴度值和高抗體滴度值，樣本以大樣本量為宜，標(biāo)準(zhǔn)差至少在30以上。
相對(duì)抗體的概念解決了不同實(shí)驗(yàn)室之間，不同試劑盒之間和不同類(lèi)型樣品之間(如血液與唾液)的測(cè)定值的可比性問(wèn)題，相對(duì)抗體值的大小亦不受試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照值大小的影響。而絕對(duì)量抗體則不具備此類(lèi)特性。
重要說(shuō)明:
唾液中出現(xiàn)分泌型抗體，說(shuō)明機(jī)體近期被病原感染或近期接受弱毒疫苗的免疫接種；分泌型抗體的出現(xiàn)，也同時(shí)說(shuō)明機(jī)體具備對(duì)某病原的實(shí)質(zhì)性抵抗能力。
